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　　单分散羧基化聚苯乙烯微球的制备:

　　以分散聚合制备的直径2μm左右的聚苯乙烯微球为种子,通过种子聚合的方法制备了粒径在5-15μm的羧基化聚苯乙烯微球,并对种子聚合的机理,共聚的可行性进行了探讨,同时探索了单体溶胀时间,苯乙烯的加入量,甲基丙烯酸的加入量等反应条件对微球粒径和形貌的影响;通过酶联免疫反应评价了微球的表面反应能力和羧基的活性.

　　实施例16空白pmaa纳米凝胶的制备将甲基丙烯酸(500mg)，甲叉双丙烯酰胺(55.6mg)和偶氮二异丁腈(16.8mg)，加入到干燥的50ml单颈圆底烧瓶中，接着加入40ml无水乙腈，超声使溶解。通氮气0.5小时以除去反应体系中的空气，接着将反应混合物加热至沸腾状态并保持2小时。待反应结束后，收集反应混合物，以1×104转/分钟的转速离心10分钟，得空白pmaa纳米凝胶。接着，加入20ml乙腈，超声分散均匀，离心，重复此操作三次，获得白的空白pmaa纳米凝胶。马尔文粒度仪测得的该纳米凝胶的粒径为425±6nm，电位为22.5±1.7mv。

　　Poly(ethylene oxide-b-propylene oxide)聚氧乙烯-b-聚环氧丙烷PEO-b-PtBuA

　　Poly(ethylene oxide-b-t-butyl acrylate)

　　聚氧乙烯-b-聚丙烯酸三丁酯

　　PEO-b-PtBUM

　　Poly(ethylene oxide-b-t-butyl methacrylate)

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　　荧光光谱法对于具有荧光性质的模板分子,荧光光谱法是选择功能单体的比较好的方法。荧光供体分子(模板分子)与荧光猝灭剂分子(功能单体)之间借助分子间力,彼此结合形成具有一定结构的不发荧光的基态复合物,而导致荧光强度减弱。即静态荧光猝灭现象。 (4)计算机模拟计算 随着计算机和量子化理论的发展,计算机模拟技术已经应用到分子印迹体系中。这种方法可以大大减少摸索实验的次数,也可以减少不必要的品浪费。计算机模拟计算常用半经验计算方法,大致过程为,步,用软件优化各种可能的模板分子、功能单体及其复合物的构象,选出小能量构象。第2步,功能单体与模板分子的相互作用能利用下式计算:△E=E(模板分子和功能单体的复合物)-E(模板分子)-E (功能单体)。△E越大,说明模板分子与功能单体的作用越易形成氢键,且形成的氢键越牢固。

　　试验例4本发明纳米凝胶对癌细胞的抑制作用采用流式细胞仪，对于细胞凋亡情况进行分析。分别用pbs，空白pmaa纳米凝胶(根据实施例16制备)，非还原响应性p(cpt-maa)纳米凝胶(根据实施例5制备)，p(cpt-maa)前纳米凝胶(根据实施例6制备)和游离cpt与细胞共培养12小时，其中给剂量以cpt含量计为2.5mg/ml。收集细胞，用冷pbs(ph7.4)洗涤三次，用annexin-v-fitc凋亡检测试剂盒(invitrogen)处理，然后在beckmancoulter流式细胞仪(navios，beckman，usa)上分析。