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将10 g硅胶颗粒在甲烷磺酸溶液中浸泡24 h后用丙酮和蒸馏水冲洗, 得到活化硅胶颗粒。然后, 将15 m L交联剂TTS和10 g的活化硅胶颗粒加入到200 m L体积比为1∶1的乙醇和水混合溶液中, 在50℃下反应24 h, 得到表面修饰的TTS-Si O2。3 g的TTS-Si O2和10 g的MAA加入200 m L水溶液中, 并加入引发剂过硫酸铵, 通入氮气, 并在70℃下反应7 h。获得的产物用乙醇洗去未结合的MAA。最后, 在60℃下干燥4 h得到终产物PMAA/Si O2。而PAM/Si O2的获得与上述方法类似, 只是在反应中将10 g MAA换成AM。
Zhu等[16]在硅胶表面通过APTES和丙烯酰氯 (AC) 两步接枝, 以咪唑为模板, MAA为单体, EGDMA为交联剂制备了咪唑SSMIP (如图2所示) 。采用静态吸附、固相萃取 (SPE) 和液相谱 (HPLC) 研究SSMIP的吸附性能和选择性。结果表明, SSMIP和SSNIP (Non-imprinted polymer) 对咪唑的大吸附容量分别为312μmol/g和169μmol/g, 达到吸附平衡所需时间为30min, 其吸附过程符合拟二级动力学模型;与SSNIP相比, SSMIP表现出更高的吸附性能。将SSMIP用作固相萃取填料, 可以从溴化1-己基-3-甲基咪唑鎓 ([C6mim][Br]) 和2, 4-二氯苯酚 (2, 4-DCP) 的混合物中选择性分离咪唑, 对咪唑和[C6mim][Br]的回收率分别为97.6%~102.7%和12.2%~17.3%, 而2, 4-DCP在SSMIP-SPE萃取柱上没有保留。
指将物溶解在与水不混溶的有机溶剂中,聚合物可以溶解在有机相或水相,在搅拌的条件下将有机相加入水相,然后抽真空将有机相挥发。4、 溶剂挥发法
指将物和聚合物溶解于易挥发的有机溶剂中,再将有机溶剂挥去,形成聚合物物膜,然后通过剧烈搅拌将膜重新分散在水中。
指将物和聚合物溶于可用于冻干的有机溶剂(一般是叔丁醇) 后,再与水混合,冻干后聚合物胶束分散于等渗的水性介质中。
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结果如图10所示。在连续5次注射后,在组中,给10mg/kg(以喜树碱含量计)的p(cpt-maa)前纳米凝胶显示出高的抑制肿瘤生长率。注射21天后,肿瘤体积(187.3±92.3mm3)显著低于pbs处理的小鼠(1354.4±283.3mm3,p<0.01),空白pmaa纳米凝胶(1251.1±301.2mm3,p<0.01)和非还原敏感的p(cpt-maa)纳米凝胶(955.5±169.1mm3,p<0.01),略低于p(cpt-maa)前纳米凝胶5mg/kgcpt处理的小鼠(418.3±96.2mm3,p<0.05)。给予5mg/kg游离喜树碱的组在初13天也获得良好的抗肿瘤效果,但它引起较严重的毒副作用:游离cpt组中的小鼠显示出度疼痛的状况,并且体重显着降低22%;更糟糕的是,该组中的小鼠在13天后迅速死亡。相反,用p(cpt-maa)前纳米凝胶处理的小鼠的体重和疼痛状态没有显著变化,即使给予10mg/kg的治疗剂量。
本发明提供了喜树碱前凝胶,它是包含喜树碱前、甲基丙烯酸、交联剂和引发剂的原料通过聚合制备得到,其中,所述喜树碱前的结构如式ⅰ所示:本发明是基于发明人的下列发现而完成的:
实体肿瘤组织的微环境与正常组织的微环境显著不同,归因于实体肿瘤组织的来源、营养供应、生长形式、代谢途径等。具体而言,谷胱甘肽(gsh~2-10mm)的浓度在细胞质中显著高于细胞外(~2-20μm)和血液(~1~2μm);与正常组织和血液循环的ph相比(~7.4),肿瘤组织中存在较低的ph(~5.7-6.8),这归因于肿瘤组织的高糖酵解速率;此外,晚期内体和溶酶体(ph~4.5-5.5)在肿瘤细胞中具有的ph。