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　　单分散羧基化聚苯乙烯微球的制备:

　　以分散聚合制备的直径2μm左右的聚苯乙烯微球为种子,通过种子聚合的方法制备了粒径在5-15μm的羧基化聚苯乙烯微球,并对种子聚合的机理,共聚的可行性进行了探讨,同时探索了单体溶胀时间,苯乙烯的加入量,甲基丙烯酸的加入量等反应条件对微球粒径和形貌的影响;通过酶联免疫反应评价了微球的表面反应能力和羧基的活性.

　　实施例6、7、10～12中交联剂的用量分别占原料总质量的10％、5％、15％、20％。经比较可以看出，随着交联剂用量的增加，制备得到p(cpt-maa)纳米凝胶的粒径随之增大，接枝率也有所提升。实施例13还原响应性p(cpt-maa)纳米凝胶-8的制备

　　将cpt-ss-m(25mg)，甲基丙烯酸(475mg)，甲叉双丙烯酰胺(55.6mg)和偶氮二异丁腈(16.8mg)，加入到干燥的50ml单颈圆底烧瓶中，接着加入40ml无水乙腈，超声使溶解。通氮气0.5小时以除去反应体系中的空气，接着将反应混合物加热至沸腾状态并保持2小时。待反应结束后，收集反应混合物，以1×104转/分钟的转速离心10分钟，得p(cpt-maa)纳米凝胶。接着，加入20ml乙腈，超声分散均匀，离心，重复此操作三次，获得较纯的黄的p(cpt-maa)前纳米凝胶。该方法下cpt-ss-m的接枝率为94.3±1.2％，马尔文粒度仪测得的该纳米凝胶的粒径为423±7nm，电位为-21.5±1.4mv。

　　其中，cpt-ss-m接枝率的计算方法如下:收集纯化过程中的乙腈溶液，通过hplc测定其中cpt-ss-m的含量，则接枝率为(起始投料cpt-ss-m的量-测得cpt-ss-m的量差值)×100％/起始投料cpt-ss-m的量。hplc测定条件为:

　　仪器:agilent1260,agilent,usa；

　　谱柱:c18，4.6mm×150mm,5μm,agilent,usa；

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　　Poly(t-butyl methacrylate-b-2-vinylpyridine)聚甲基丙烯酸叔丁酯-b-聚乙烯基吡啶

　　PHEA-b-PNPA

　　Poly(2-hydroxyethyl acrylate-b-neopentylacrylate)

　　聚2-羟乙基丙烯酸酯-b-聚新戊酯

　　PMMA-b-PCL

　　结果如图10所示。在连续5次注射后，在组中，给10mg/kg(以喜树碱含量计)的p(cpt-maa)前纳米凝胶显示出高的抑制肿瘤生长率。注射21天后，肿瘤体积(187.3±92.3mm3)显著低于pbs处理的小鼠(1354.4±283.3mm3，p<0.01)，空白pmaa纳米凝胶(1251.1±301.2mm3，p<0.01)和非还原敏感的p(cpt-maa)纳米凝胶(955.5±169.1mm3，p<0.01)，略低于p(cpt-maa)前纳米凝胶5mg/kgcpt处理的小鼠(418.3±96.2mm3，p<0.05)。给予5mg/kg游离喜树碱的组在初13天也获得良好的抗肿瘤效果，但它引起较严重的毒副作用:游离cpt组中的小鼠显示出度疼痛的状况，并且体重显着降低22％；更糟糕的是，该组中的小鼠在13天后迅速死亡。相反，用p(cpt-maa)前纳米凝胶处理的小鼠的体重和疼痛状态没有显著变化，即使给予10mg/kg的治疗剂量。