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　　单分散羧基化聚苯乙烯微球的制备:

　　以分散聚合制备的直径2μm左右的聚苯乙烯微球为种子,通过种子聚合的方法制备了粒径在5-15μm的羧基化聚苯乙烯微球,并对种子聚合的机理,共聚的可行性进行了探讨,同时探索了单体溶胀时间,苯乙烯的加入量,甲基丙烯酸的加入量等反应条件对微球粒径和形貌的影响;通过酶联免疫反应评价了微球的表面反应能力和羧基的活性.

　　聚异丁烯-b-聚甲基丙烯酸

　　PS-b-PAMD

　　Poly(styrene-b-acrylamide)聚苯乙烯-b-聚丙烯酰胺

　　PS-b-PAA

　　Poly(styrene-b-acrylic acid)

　　聚苯乙烯-b-聚丙烯酸

　　PS-b-PACs

　　Poly(styrene-b-cesium acrylate)

　　试验例2体外细胞毒性测试选择人肝癌细胞hepg2和成纤维细胞l929以研究纳米凝胶的细胞毒性。将细胞在含有10％fbs和抗生素(青霉素和链霉素，100u/ml)的dmem培养基中，于37℃在含有5％co2的潮湿气氛中温育。

　　使用mtt测定法在l929细胞和hepg2细胞上测试细胞毒性。简而言之，将对数期的细胞接种到96孔板中。在100μldmem中孵育24小时后，将在100μldmem中具有不同浓度的一系列p(cpt-maa)前纳米凝胶(根据实施例6制备)加入每个孔中并进一步孵育24,48和72小时。在预定时间点，用200μl新鲜dmem替换培养基，加入20μlmtt溶液(5mg/ml，在生理盐水中)。进一步温育4小时后，弃去培养基并用150μldmso替换。摇动后，通过酶标仪在570nm处测量每个孔的光密度(od)。结果在六个单独的实验中取平均值，并表示为平均值±sd。细胞活力(cv)计算如下等式:cv(％)＝od(处理的)/od(未处理的)×100％。此外，如上所述评估空白纳米凝胶(根据实施例16制备)的细胞毒性。

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　　本发明涉及喜树碱前凝胶及其制备方法和用途，属于医领域。作为主要的恶性疾病之一，癌症严重威胁着人类的健康，并导致医疗负担逐年大幅增加。化疗是常用和有效的治疗方法之一，但目前尚未开发出对肿瘤组织具有良好治疗效果且对正常组织毒性低的理想化疗物。喜树碱(cpt)是一种五环喹啉类生物碱物，具有的抗肿瘤作用，在结肠癌，肺癌，乳腺癌，卵巢癌，黑素瘤和其他癌症中展现出的治疗效果。cpt主要抑制核内酶拓扑异构酶i(dna复制和转录过程所的)的活性，从而dna链的连接，导癌细胞死亡。然而，因其固有的高毒性、水溶性差和结构不稳定的缺陷，cpt的应用受到大限制。

　　当反应温度升至80℃左右时开始滴加引发剂溶液和甲基丙烯酸溶液，控制滴加速度使反应维持3～4h并使反应温度控制在85～90℃之间。聚合反应完毕，冷却反应物，取样测定产物的黏度、固含量，检查产物的阻垢率，合格后桶入库。方法2:一种近临界水中聚甲基丙烯酸甲酯无催化水解制备聚甲基丙烯酸的方法。方法的步骤如下:

　　1) 在高压反应釜中加入去离子水和聚甲基丙烯酸甲酯，去离子水与聚甲基丙烯酸甲酯的质量比为1∶1~40∶1，开搅拌，常压下升温至沸腾，打开排气阀2~5分钟；