探针法衣原体科通用实时定量PCR检测试剂盒
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Chlamydiaceae
货号:Cqt-cea-20 规格:20个反应
货号:Cqt-cea-50 规格:50个反应
货号:Cqt-cea-100 规格:100个反应
试剂盒特点:
1, 特异性检测衣原体/嗜衣原体属,仅与衣原体目(Chlamydiales order )细菌的少数几种(Estrella lausannensis,Waddlia chondrophila,Simkania negevensis)有微弱交叉反应,与衣原体目以外的其他生物基因组无交叉反应。
2, 灵敏度高,最低检测极限约56个基因组/反应。
3, DNA聚合酶采用热启动方式,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。
4, 带有阳性对照样品,可用于检验试剂盒有效性。
5, 带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。
衣原体科(Chlamydiaceae)属于衣原体门(Chlamydiae phylum)衣原体目(Chlamydiales order),于1966年首次确立。1999年根据仅有的4个成员的RNA基因序列,将其分为两个种属:衣原体属(Chlamydia)和嗜衣原体属(Chlamydophila)。随着更多衣原体种类的发现,两个种属之间的区别不再明显,因此2010年正式将二者重新合并为一个种属,仍称为衣原体属(Chlamydia)。衣原体最早发现于1935年,现在已发现的有约15种,全部是专性细胞内寄生,在人和动物中可引起疾病。目前已在人、哺乳动物、鸟类和爬行类动物中发现衣原体。很多衣原体可感染多种宿主,有些则具有宿主特异性,只感染一种或一类宿主。可感染人类的衣原体有:沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis),肺炎衣原体(Chlamydophila pneumoniae),鹦鹉热衣原体(Chlamydophila psittaci),流产衣原体(Chlamydophila abortus)等。衣原体主要侵袭呼吸道、胃肠道或生殖系统的粘膜,感染位点和严重程度与衣原体种类和宿主都有关系。感染后在多数动物中会引起结膜炎和鼻粘膜炎,或者侵袭生殖系统导致流产和不育,但有时并不表现出症状。鸟类感染鹦鹉热衣原体后常处于亚临床状态,在压力下可能出现临床症状,表现为重度肺炎和器官衰竭。人类可在养鸟过程中被感染,产生类似流感的症状,常造成误诊导致严重后果。
衣原体可以通过培养法和血清学方法进行检测。由于衣原体是专性细胞内寄生,因此必须在活组织或细胞内进行培养,操作复杂,耗时,灵敏度低。血清学方法同样灵敏度较低,且只能在已感染一段时间之后才能检测。PCR法具有灵敏度高、特异性强的优点,检测速度快,只需两三个小时即可完成,可以有效弥补上述两种方法的不足。
本试剂盒针对16S-23S rRNA基因区间序列设计特异性引物和探针,可以特异性识别各种衣原体/嗜衣原体,经BLAST验证,仅与衣原体目(Chlamydiales order )细菌的少数几种(Estrella lausannensis,Waddlia chondrophila,Simkania negevensis)有微弱交叉反应,与其他生物基因组没有交叉反应。在高浓度的情况下,这几种衣原体目细菌有可能产生特异性信号。本试剂盒检测了145个生物样品,包括结膜拭子、鼻腔拭子、奶、新鲜组织、体液和粪便等各种类型,获得125个阳性,与DNA微点阵法检测结果基本一致,配合测序结果证实其中包含6种衣原体,包括一种未报道过的新衣原体物种。
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