染料法鹦鹉热衣原体实时定量PCR试剂盒
Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Chlamydia psittaci
货号:Cqs-psi-20 规格:20个反应
货号:Cqs-psi-50 规格:50个反应
货号:Cqs-psi-100 规格:100个反应
储存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反复冻融。
试剂盒特点:
1, 特异性检测鹦鹉热衣原体,与其他生物基因组无交叉反应。
2, 灵敏度明显高于血清学方法,大约高于普通PCR法十倍。
3, DNA聚合酶采用热启动方式,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。
4, 带有阳性对照样品,可用于检验试剂盒有效性。
5, 带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。
6, 带有ROX参比染料,帮助校正加样误差和管间差异。
鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci),或称鹦鹉热嗜衣原体/鹦鹉热亲衣原体(Chlamydophila psittaci)、鹦鹉衣原体,是一种严格细胞内寄生的原核生物,属于衣原体科(Chlamydiaceae)。鹦鹉热衣原体是最早发现的衣原体,宿主非常广泛,不仅有包括鹦鹉在内的多种鸟类,还有许多哺乳动物;在许多宿主中已形成独特的亚型,部分亚型已被划分为独立物种,如:兽类衣原体(Chlamydia pecorum)、流产衣原体(Chlamydia abortus)、豚鼠衣原体(Chlamydia caviae)、猫衣原体(Chlamydia felis)等。鹦鹉热衣原体的传播可通过直接接触、鸟粪、鼻分泌物和气溶胶,引起鸟类和哺乳动物的呼吸道疾病;由于可在环境中保持感染力达数月之久,因此可以造成公共安全威胁,包括在家禽养殖中的大规模爆发,以及在人类中偶尔引发的鹦鹉病(或称鸟疫、鹦鹉热)。人类一般是从家养或野生鸟类获得感染,人与人之间的传播尚待证实,人类感染后常没有症状或出现类似流感的症状,有时会发展为严重肺炎、心内膜炎或脑炎。鹦鹉热衣原体分为很多基因型,包括:A–F, M56和WC,每种亚型都具有严格的宿主特异性:A亚型宿主为鹦鹉科鸟类,B亚型宿主为鸽,C亚型宿主为鸭和鹅,D亚型宿主为火鸡,E亚型宿主为鸽、鸭及其他鸟类,F亚型宿主为鹦鹉,WC亚型宿主为牛,M56亚型宿主则为啮齿类动物。
鹦鹉热衣原体可使用培养法和血清学方法进行检测。鹦鹉热衣原体在鸡胚卵黄囊及HeLa细胞、猴肾细胞培养中易于生长,但由于耗时费力,对实验者技能和设备要求也比较高,因此培养法很少使用。一些血清学方法,如:补体结合试验、间接血凝试验技术、ELISA、微量免疫荧光法,常用于检测鹦鹉热衣原体,其缺点在于可能与其他衣原体产生交叉反应,且灵敏度较低,不适用于早期感染。PCR法是一种体外酶促合成特异性DNA 片段的方法,更适合检测鹦鹉热衣原体,其灵敏度高,且特异性强,检测速度快,只需两三个小时即可完成。定量PCR法与普通PCR法相比,操作更为方便,更少受环境污染的影响。定量PCR法又分为染料和探针两种指示方式,在保证引物特异性的前提下,染料法可以用更低的成本达到同样的检测效果。
本试剂盒采用染料法定量PCR,针对16S-23S rRNA基因区间序列设计引物,特异性识别鹦鹉热衣原体,经BLAST验证,与其他生物基因组没有交叉反应。使用本试剂盒检测了9种不同的衣原体,和可能引起类似症状的20种细菌和4种病毒,未发现非特异性信号;对327个鸟类样本进行检测,获得47个阳性。可见本试剂盒适用于鹦鹉热衣原体的检测和鉴定。
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