间充质干细胞培养基说明书

　　干细胞按能力可以分为以下四类:

　　1.全能干细胞

　　由卵和精细胞的融合产生受精卵。而受精卵在形成胚胎过程中四细胞期之前任一细胞皆是全能干细胞。具有发展成独立个体的能力。也就是说能发展成一个个体的细胞就称为全能干细胞。

　　2.万能干细胞

　　是全能干细胞的后裔，无法发育成一个个体，但具有可以发育成多种组织的能力的细胞。

　　3.多能干细胞

　　只能分化成特定组织或器官等特定族群的细胞（例如血细胞，包括红血细胞、白血细胞和血小板）。

　　4.专一性干细胞

　　只能产生一种细胞类型；但是，具有自更新属性，将其与非干细胞区分开。

　　冷冻保护液的添加用 1640培养液将无菌的保护液 (DMS〇 )配 成 20 % 浓 度 ，取与胎肝悬液等体积的2 0 % D M S O , 缓慢加人细胞悬液中，室温静置 10min ，再将样品放入降温仪中。程序降温法:多采用两步或三步降温法，即 开 始 时 从 室 温 以 降 温 ，降至- 3 0 ℃时 ，恒 温 2m i n 后 改 为 5——7℃ /m i n 降至-80℃或- 9 0℃ ， 再转入液氮中 ( - 1 9 6 ℃ ) 长期保存。也有人主张开始降温速度应严格控制在1-3℃ /min，但经过相变(-11—15℃)热释放之后即可加速降温速度，余下各阶段对细胞存活影响不大。

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　　整合素（Integrin）与细胞外基质整合素家族是介导干细胞与细胞外基质粘附的主要的分子。整合素与其配体的相互作用为干细胞的非分化增殖提供了适当的微环境。比如当β1整合素丧失功能时，上皮干细胞逃脱了微环境的制约，分化成角质细胞。此外细胞外基质通过调节β1整合素的表达和，从而影响干细胞的分布和分化方向。干细胞的可塑性越来越多的据表明，当成体干细胞被移植入受体中，它们表现出很强的可塑性。通常情况下，供体的干细胞在受体中分化为与其组织来源一致的细胞。而在某些情况下干细胞的分化并不遵循这种规律。1999年Goodell等人分离出小鼠的肌肉干细胞，体外培养5天后，与少量的骨髓间质细胞一起移植入接受致死量辐射的小鼠中，结果发现肌肉干细胞会分化为各种血细胞系。这种现象被称为干细胞的横向分化（trans-differentiation）[5]。关于横向分化的调控机制目前还不清楚。大多数观点认为干细胞的分化与微环境密切相关。可能的机制是，干细胞进入新的微环境后，对分化信号的反应受到周围正在进行分化的细胞的影响，从而对新的微环境中的调节信号做出反应。

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　　不良反应者,79.5%被诊断为糖尿病酮症酸中毒。所以干细胞移植疗法对糖尿病患者来说，是一种有效的治疗选择。在这些实验中,治疗结果好的是用CD34 +造血干细胞治疗1型糖尿病,而效果差的治疗结果是采用脐带血治疗1型糖尿病。而糖尿病酮症酸中毒是干细胞疗法的大不良反应。脐带血”干细胞真的能成功治疗糖尿病?这个问题会从其发展阶段以及治疗流程做一个简明扼要的表述。首先从1999年有生物专家首次公布间充质干细胞具有多向分化潜能，这一发现在整个世界掀起了轩然大波，随后各个国家均大力的支持展开生命科学领域间充质干细胞的临床研究课题。

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