最新男性不育干细胞生精技术

　　干细胞按能力可以分为以下四类:

　　1.全能干细胞

　　由卵和精细胞的融合产生受精卵。而受精卵在形成胚胎过程中四细胞期之前任一细胞皆是全能干细胞。具有发展成独立个体的能力。也就是说能发展成一个个体的细胞就称为全能干细胞。

　　2.万能干细胞

　　是全能干细胞的后裔，无法发育成一个个体，但具有可以发育成多种组织的能力的细胞。

　　3.多能干细胞

　　只能分化成特定组织或器官等特定族群的细胞（例如血细胞，包括红血细胞、白血细胞和血小板）。

　　4.专一性干细胞

　　只能产生一种细胞类型；但是，具有自更新属性，将其与非干细胞区分开。

　　2000年，由Pera、 Trounson 和 Bongso 领导的新加坡和澳大利亚科学家从治疗不育症的夫妇捐赠的胚泡内细胞群中分离得到人ES细胞，这些细胞体外增殖，保持正常的核型，自发分化形成来源于三个胚层的体细胞系。将其注入免疫缺陷小鼠错开内产生畸胎瘤。2003，建立了人类皮肤细胞与兔子卵细胞种间融合的方法，为人胚胎干细胞研究提供了新的途径。2004年，Massachusetts Advanced Cell Technology 报道克隆小鼠的干细胞可以通过形成细小血管的心肌细胞修复心衰小鼠的心肌损伤。这种克隆细胞比来源于骨髓的成体干细胞修复作用更快、更有效，可以取代40%的瘢痕组织和恢复心肌功能。这是首次显示克隆干细胞在活体动物体内修复受损组织。

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　　将 采 集 的 P B S C 用 R P M I 1 6 4 0 营养液调细胞浓度在 2 x l 0 7—— l x l 0 8 范围内，与等量预冷的冷冻保护液混匀，分别注入低温冷冻袋内，并留取检测样品注入冷冻管。将冷冻袋(管)放入已预冷至4℃程控降温仪内，程序化降温。 -l℃/min，降至-4〇 ℃，平 衡 3 min， -5℃ /min，降至-80℃ ，取出后放人液氮内(- 1 9 6℃)保存。存放时间为 5 年 。

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　　除内源性调控外，干细胞的分化还可受到其周围组织及细胞外基质等外源性因素的影响。间质细胞能够分泌许多因子，维持干细胞的增殖，分化和存活。有两类因子在不同组织甚至不同种属中都发挥重要作用，它们是TGFβ家族和Wnt信号通路。比如TGF家族中至少有两个成员能够调节神经嵴干细胞的分化。近研究发现，胶质细胞衍生的神经营养因子（GDNF）不仅能够促进多种神经元的存活和分化，还对精原细胞的再生和分化有决定作用。GDNF缺失的小鼠表现为干细胞数量的减少，而GDNF的过度表达导致未分化的精原细胞的累积[3]。Wnts的作用机制是通过阻止β-Catenin分解从而Tcf/Lef介导的转录，促进干细胞的分化。比如在线虫卵裂球的分裂中，邻近细胞导的Wnt信号通路能够控制纺锤体的起始和内胚层的分化。

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