公司 细胞实验

　　脐血干细胞 脐血又称胎盘血或脐带血，是胎儿出生时脐带内和胎盘近胎儿一侧血管内的血液。其中，脐血干细胞是脐血中的一种具有分化潜能的原始细胞，具备自我更新和增殖的能力，并能在特定因素的影响或诱导下，向各种细胞或组织分化。目前的研究中，脐血中的造血干/祖细胞主要用于的治疗，包括白血病、、等。并且由于脐带血中所含干细胞的免疫功能尚未发育完全，所以在配型上相对容易许多，尤其在家人中间几率更高。

　　目前干细胞存储的设备为液氮罐，主要为液相和气相两种，存储温度设定在-150℃至-196℃之间，确保干细胞的质量。相较于液相液氮罐，气相液氮罐具有样本间的交叉污染、降低样本爆管的风险、损耗低等优势，当前大多数存储机构都选择气相液氮罐存储。存多久——干细胞存储期限理论来讲，干细胞可以长期存储，不会低于人体的寿命。干细胞存储在液氮环境下，细胞处于休眠状态，而且细胞内的生命活动接近停止，可无限期存储。当前自体存储期限一般分为5年、10年、15年、20年等。

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　　冷冻保护液的添加用 1640培养液将无菌的保护液 (DMS〇 )配 成 20 % 浓 度 ，取与胎肝悬液等体积的2 0 % D M S O , 缓慢加人细胞悬液中，室温静置 10min ，再将样品放入降温仪中。程序降温法:多采用两步或三步降温法，即 开 始 时 从 室 温 以 降 温 ，降至- 3 0 ℃时 ，恒 温 2m i n 后 改 为 5——7℃ /m i n 降至-80℃或- 9 0℃ ， 再转入液氮中 ( - 1 9 6 ℃ ) 长期保存。也有人主张开始降温速度应严格控制在1-3℃ /min，但经过相变(-11—15℃)热释放之后即可加速降温速度，余下各阶段对细胞存活影响不大。

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　　由于保存方法的不同，复温的形式有多种。从液氮中取出样品，在 37——42℃水浴下复温，时间不超过 5 min。过滤脐带血，将其置入过的输液瓶里，封 口 ，待患者使用。取出样品复温，水浴温度控制在4 1 ℃ ，每份脐血均可在2m i n 内冻融。加入等体积的 5 % 白蛋白和 10% L M D 混合液，混匀平衡 5 min 后离心去 D M S O , 再 用 L M D 调细胞悬液。

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