唯尔克干细胞

　　脐带血干细胞及其移植脐带血中含有多种类型的干细胞，主要包括造血干细胞（HSCs)）、间充质干细胞（MSCs）和内皮祖细胞（EPCs)）等。其中，造血干细胞和间充质干细胞在脐带血中含量较多。

　　造血干细胞可分化为所有类型的血细胞；间充质干细胞在一定条件下进行体外培养和诱导可以向神经、成骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉和心肌等细胞方向分化，两者均已广泛应用于临床干细胞移植研究。

　　临床冻存 P B S C 常采 用 0.5xl08—— 1.0xl08个/ m l 的细胞浓度。McElwain、 Mangalik、 Bumett等分别将骨髓造血干细胞在 4°C保 存 8 h 、 72 h 和 48 h后进行回输，并取得了成功。非 低 温 4 ¾ 保 存 P B S C ， 简化了移植过程，无需加入冷冻保护 液 ，避免冻存过程对细胞的损害，仅需要骨髓保养液，可减少回输时的毒副作用；减少 P B S C 在体外污染的机会；有利于造血重建。因此它是一种简便可行，，经济有效的体外保存方法。缺点是保存时间较短，不 宜 超 过 72 h ，当预处理方案为3〜 4 天

　　唯尔克干细胞

　　干细胞自身有许多调控因子可对外界信号起反应从而调节其增殖和分化，包括调节细胞不对称分裂的蛋白，控制基因表达的核因子等。另外，干细胞在终末分化之前所进行的分裂次数也受到细胞内调控因子的制约。细胞内蛋白对干细胞分裂的调控干细胞分裂可能产生新的干细胞或分化的功能细胞。这种分化的不对称是由于细胞本身成分的不均等分配和周围环境的作用造成的。细胞的结构蛋白，是细胞骨架成分对细胞的发育重要。如在果蝇卵巢中，调控干细胞不对称分裂的是一种称为收缩体的细胞器，包含有许多调节蛋白，如膜收缩蛋白和细胞周期素A。收缩体与纺锤体的结合决定了干细胞分裂的部位，从而把维持干细胞性状所的成分保留在子代干细胞中。

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　　胎肝细胞悬液的制备人胎肝取至水囊引产或剖腹产的4〜6个月正常胎儿。在无菌条件下从腹腔取出胎肝，同时从心脏取血查胎儿血型。剔除粘连在肝脏表面的结缔组织和胆囊后，将肝脏置于培养皿中剪成小组织块，然后投入装有双层不锈钢(内层孔径为 1 0 0 目，外 层 为 1 8 0 目/in2(lin2=6.451600xl0-4 m 2))的小烧杯。用少量培养液或生理盐水(经细胞培养，热原试验均为阴性)，将组织块冲洗2〜 3 次 ，弃去洗涤液，然后倒入20 ml P R M I 1640培养液，并用注射器针芯在钢网内将组织块研磨，如此 重 复 3 次 ，即可取出胎肝中大部分的造血干细胞。将合并收集的细胞悬液通过4 号的注射器制成单细胞悬液。

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