哪里的干细胞技术最好

　　脐带血干细胞及其移植脐带血中含有多种类型的干细胞，主要包括造血干细胞（HSCs)）、间充质干细胞（MSCs）和内皮祖细胞（EPCs)）等。其中，造血干细胞和间充质干细胞在脐带血中含量较多。

　　造血干细胞可分化为所有类型的血细胞；间充质干细胞在一定条件下进行体外培养和诱导可以向神经、成骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉和心肌等细胞方向分化，两者均已广泛应用于临床干细胞移植研究。

　　也有选用单一冷冻保护液的。 Galmes等(1995)首先提出以10% D M S O 为保护液，细胞冷冻后储存于-80℃的方法。 Hemandez-Navarro等 以 10% D M S O 和 H A S 混合物为冷冻保护液，将 装 有 P B S C 的冷冻袋放入9 5 % 甲醇液中，直接置于-80°C 保存，细胞回输后造血恢复情况与其他方法无明显差异。叶韵斌等(2000)对 使 用 10% D M S O 单一保护液和 5 % D M S O + 6 % H E S + 4 % A L B 混合保护液的效果进行比较，发现在冻存180天以内二者差异不大，细胞活力在8 5 % 以上， C D 34+阳性细胞比例、粒单集落数均维持治疗水平。

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　　临床冻存 P B S C 常采 用 0.5xl08—— 1.0xl08个/ m l 的细胞浓度。McElwain、 Mangalik、 Bumett等分别将骨髓造血干细胞在 4°C保 存 8 h 、 72 h 和 48 h后进行回输，并取得了成功。非 低 温 4 ¾ 保 存 P B S C ， 简化了移植过程，无需加入冷冻保护 液 ，避免冻存过程对细胞的损害，仅需要骨髓保养液，可减少回输时的毒副作用；减少 P B S C 在体外污染的机会；有利于造血重建。因此它是一种简便可行，，经济有效的体外保存方法。缺点是保存时间较短，不 宜 超 过 72 h ，当预处理方案为3〜 4 天

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　　冷冻保护液的添加用 1640培养液将无菌的保护液 (DMS〇 )配 成 20 % 浓 度 ，取与胎肝悬液等体积的2 0 % D M S O , 缓慢加人细胞悬液中，室温静置 10min ，再将样品放入降温仪中。程序降温法:多采用两步或三步降温法，即 开 始 时 从 室 温 以 降 温 ，降至- 3 0 ℃时 ，恒 温 2m i n 后 改 为 5——7℃ /m i n 降至-80℃或- 9 0℃ ， 再转入液氮中 ( - 1 9 6 ℃ ) 长期保存。也有人主张开始降温速度应严格控制在1-3℃ /min，但经过相变(-11—15℃)热释放之后即可加速降温速度，余下各阶段对细胞存活影响不大。

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