上海免疫细胞治疗

　　脐带血干细胞的作用:

　　脐带血中含有大量的干细胞，干细胞是生命的种子，它会分化成人体的各种细胞，结出各种不同的果实——血液细胞，神经细胞，骨骼细胞等等。随着科技的发达，医学专家研究出利用脐带血中的干细胞来治疗疾病的方法。

　　干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体。这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量，又可进一步分化为各种组织细胞，从而在组织修复等方面发挥积极作用。

　　近三十年来的医学研究发现，脐带血中含有非常丰富的造血干细胞（HSC），可以重建人体造血和免疫系统，可用于造血干细胞移植，治疗血液系统、免疫系统，以及遗传代谢性及先天性疾病。因此，脐带血已成为造血干细胞的重要来源，已经被广泛地应用于临床，是宝贵的人类生物资源。

　　肌肉干细胞(muscle stem cell)可发育分化为成肌细胞(myoblasts)，后者可互相融合成为多核的肌纤维，形成骨骼肌基本的结构。编辑本段基础应用干细胞的调控是指给出适当的因子条件，对干细胞的增值和分化进行调控，使之向指定的方向发展。干细胞自身有许多调控因子可对外界信号起反应从而调节其增殖和分化，包括调节细胞不对称分裂的蛋  人体胚胎干细胞白，控制基因表达的核因子等。另外，干细胞在终末分化之前所进行的分裂次数也受到细胞内调控因子的制约。   细胞内蛋白对干细胞分裂的调控    干细胞分裂可能产生新的干细胞或分化的功能细胞。这种分化的不对称是由于细胞本身成分的不均等分配和周围环境的作用造成的。细胞的结构蛋白，是细胞骨架成分对细胞的发育重要。如在果蝇卵巢中，调控干细胞不对称分裂的是一种称为收缩体的细胞器，包含有许多调节蛋白，如膜收缩蛋白和细胞周期素A。收缩体与纺锤体的结合决定了干细胞分裂的部位，从而把维持干细胞性状所的成分保留在子代干细胞中。   转录因子的调控    在脊椎动物中，转录因子对干的调节重要。比如在胚胎干细胞的发生中，转录因子Oct4是的。Oct4是一种哺乳动物早期胚胎细胞表达的转录因子，它导表达的靶基因产物是FGF-4等生长因子，能够通过生长因子的旁分泌作用调节干细胞以及周围滋养层的进一步分化。Oct4缺失突变的胚胎只能发育到囊胚期，其内部细胞不能发育成内层细胞团 。另外白血病抑制因子（LIF）对培养的小鼠ES细胞的自我更新有促进作用，而对人的成体干细胞无作用，说明不同种属间的转录调控是不一致的。又如Tcf/Lef转录因子家族对上皮干细胞的分化重要。Tcf/Lef是Wnt信号通路的中间介质，当与β-Catenin形成转录复合物后，促使角质细胞转化为多能状态并分化为毛囊。

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　　临床冻存 P B S C 常采 用 0.5xl08—— 1.0xl08个/ m l 的细胞浓度。McElwain、 Mangalik、 Bumett等分别将骨髓造血干细胞在 4°C保 存 8 h 、 72 h 和 48 h后进行回输，并取得了成功。非 低 温 4 ¾ 保 存 P B S C ， 简化了移植过程，无需加入冷冻保护 液 ，避免冻存过程对细胞的损害，仅需要骨髓保养液，可减少回输时的毒副作用；减少 P B S C 在体外污染的机会；有利于造血重建。因此它是一种简便可行，，经济有效的体外保存方法。缺点是保存时间较短，不 宜 超 过 72 h ，当预处理方案为3〜 4 天

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　　脐带血直接保存作者所在实验室从医院取回的脐带血未经处理直接加入等体积的保护液，液氮保存取得较好的效果。程控降温深低温保存法保护液配方: 2 0 % 二甲基亚砜(D M S O , Sigma 公司)， 8 0 % T C E 。在冰水浴中，将浓缩的有核细胞加入等体积的低温保护液 (D M S O 终 浓 度 为 10%)，混 勻 ，样品放入 D W 微机降温仪中，以 代 /m i n 的速度降温至-40℃ ，然 后 以 5T /m i n 的速度降温至- 8 0 ℃ 后取出，置液氮中保存，有核细胞终浓度为 (2.34±2.06)xl09 个/L。

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