武汉泰特沃斯科技有限公司为您提供C18液相色谱柱的使用及维护方法。在选择色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等，

　　1.样品是极性的且弱酸性的；就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱

　　2. 如果样品极性太强，或酸性太强；可以选择CN，NH2，或硅胶柱，HILIC亲水色谱，也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱缺点是离子对试剂平衡时间长，对流动相pH要求比较精密，否 则很难重复实验，另外离子对试剂很难洗下来，基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它实验

　　3. 若样品是碱性的；可选择高纯硅胶柱高纯硅胶缺少金属杂质，且硅胶端基封尾或一些经过修饰的C18柱如极性嵌入技术或碱去活技术等，他们都会减少碱性化合物的拖尾，一般会选择中性或偏碱的条件下做，因为这样可增加碱性样品的保留。

　　4.如果碱性化合物的极性太强，或碱性太强；可以选择宽pH的C18色谱柱在高pH值检测优点是方法开发简单，缺点是目前实 现这一技术的色谱柱品牌比较少，价格也高或者选用HILIC色谱柱硅胶柱在反相条件下使用，这也是很经典的检测碱性样品的方法选择强离子交换柱缺点 是不能用来分析其它样品，对流动相pH要求比较精密，否则很难重复实验也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。

　　C18柱是一种常用的反相色谱柱，它以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，因此有较高的碳含量和更好的疏水性，对各种类型的生物大分子有更强的适应能力，适用范围较广，是液相色谱仪分析中可以选择]的色谱柱类型。

　　在使用液相色谱C18仪柱过程中，须注意以下事项:

　　1、新C18色谱柱在使用前，须先用甲chun或yi腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗，作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展，使色谱柱的性能达到好状态。具体操作是，将配制好65%的yi腈/水冲洗后，把色谱柱进口端连接在色谱仪上，出口端放空不可连上检测器，以免污染了检测器，以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速将色谱柱中的清稀溶液吹干，过20分钟后再接上检测器，以1.0ml/min的流速，继续冲洗2~8小时；

　　2、液相色谱仪检测分析样品完毕后，须冲洗色谱柱。尤其是流动相中含有酸或盐时，需将色谱柱中的酸或盐冲洗干净，通常建议用10%甲chun水冲洗20倍柱体积；

　　3、若色谱柱处于长期闲置状态时，要将色谱柱冲洗，建议冲洗3-4小时以上，后保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液如90%甲chun水中；

　　4、由于C18柱的固定相疏水性较强，在使用过程中尽量不要使用高水相条件，若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效迅速下降，甚至造成不可逆的负面影响；由于碳载量高，表现尤为明显，建议使用过程中水相比例不超过90%；

　　5、色谱柱压力升高、柱性能下降:通常为色谱柱被污染，对色谱柱进行再生处理可恢复部分柱效；

　　6、色谱柱压力骤升:通常由盐析出或筛板堵塞引起，若是盐析出，用10%甲chun水低流速冲洗至压力恢复即可；若判断并非盐析出，以纯甲chun或10%甲chun水为流动相反冲色谱柱将色谱柱反接，不接检测器，若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效，需寻找其他原因。