详细说明
酵母双杂交系统的建立基于对真核生物调控转录起始过程的认识。酵母转录因子GAL4含两个结构域:DNA结合功能域和转录激活结构域,前者可识别DNA上的特异序列,并使转录激活结构域定位于所调节基因的上游,后者同转录复合体的其他成分作用,启动相应基因的转录。将编码DNA结合功能域的基因与已知诱饵蛋白质基因构建在同一个表达载体上,在酵母中表达两者的融合蛋白,将编码DNA转录激活域的基因和cDNA文库的基因构建在AD—LIBRARY表达载体上,同时将上述两种载体转化改造后的酵母。当两种载体所表达的融合蛋白能够相互作用时,功能重建的反式作用因子能够激活酵母基因组中的报告基因,从而通过功能互补和显色反应筛选到阳性菌落。将阳性反应的酵母菌株中的AD—LIBRARY载体提取分离出来,从而对载体中插入的文库基因进行测序和分析工作。
技术服务项目:
筛选客户指定的基因文库:由客户提供诱饵基因和需要进行筛选的组织文库;我们提供详细的筛选服务报告和阳性结果序列,阳性克隆实物为客户所有。
基因钓取:为客户从相应文库中钓取所需的基因。
基因克隆:为客户将目的基因克隆到特定的载体上。
基因定点突变:为客户提供目的基因1个或多个位点核苷酸的定点突变。