水总大肠菌群/大肠杆菌（100mL）即用型干粉培养基说明书

　　一、原理

　　接种好的测试片立即置于沸水浴或蒸汽柜中，粮食制品放置15min；乳及乳制品放置30min。蒸煮结束后将自封口袋打开5cm左右的口（以测试片培养时有充足的氧气供应），55℃±1℃保持一定湿度培养48h±2h。测试片好放于平整处培养（可在培养箱中放一小块纸板），不可直接放于铁丝架上培养，容易使凝胶受挤压变形。

　　培养结束后取出测试片，计数测试片上的红菌落。谷物样品以5片测试片上的菌落数总和，再乘以8即为10g样品中嗜热芽孢总数；面粉或淀粉样品以5片测试片上的菌落数总和，再乘以10即为10g样品中嗜热芽孢总数。乳及乳制品按NY/T 1331标准计数。废弃物需经121℃高压灭菌20分钟后处理。

　　本培养基由营养成分、选择性抑制剂和显色底物组成。营养成分提供大肠菌群/大肠杆菌生长所需营养；选择性抑制剂可有效抑制其它菌的生长；大肠菌群含有β-半乳糖苷酶，分解ONPG显黄色；大肠杆菌同时含有β-半乳糖苷酶和β-葡萄糖醛酸酶，能同时分解ONPG和MUG，水样变黄的同时，在紫外灯下显蓝白荧光。

　　执行标准

　　GB 5750.12-2006(酶底物法)；NY/T 1665-2008（定性检测）。

　　三、包装规格

　　5瓶/包。

　　四、检验方法

　　1.接种

　　拧开瓶盖，将100mL水样倒入瓶中摇匀，使培养基完全溶解，拧紧瓶盖。

　　2.培养

　　36℃±1℃培养24h。

　　3.结果

　　培养结束后取出培养瓶，水样变黄为大肠菌群阳性；水样变黄同时在紫外灯下显蓝白色荧光为大肠杆菌阳性。培养瓶应拧紧瓶盖，倒放在紫外灯上观察荧光。因为紫外光穿透力弱，仅能使液体表面显荧光。如果结果为可疑阳性，可延长培养时间到28h。单位为检出或未检出/100mL。废弃物需经121℃高压灭菌20分钟后处理。

　　五、储存

　　2℃-8℃避光保存，保质期2年。