食品中的李斯特氏菌检验测试片

　　深圳市艾瑞斯仪器有限公司

　　1 原理及适用范围

　　李斯特菌测试片是一种预先制备好的一次性培养基产品，含有基础营养培养基、选择性试剂、特殊生长促进剂、冷水可溶性吸水凝胶和β-D-葡萄糖苷酶(β-D-glucosidase)的显色底物，李斯特菌

　　参考NY/T 1331标准，制备样液。取10g或者25g固体/半固体样品，加90mL或者225mL预热至45℃的稀释液（磷酸盐缓冲液或者蛋白胨-盐溶液），制成10-1样液。如果有必要可以继续稀释，选择合适的稀释度备用。将测试片置于水平台面，揭开上层薄膜，吸1mL样液滴加于培养层，缓慢盖上上层薄膜，将匀液板有凹槽部分对准样液区域轻放于上层薄膜上，手指按住压环，同时在压环内轻轻按压，使样液在压环内扩散开，充满整个压环。粮食制品每个样品接种5片，接种好的测试片放于PET自封口袋中（5片/袋），封好口。乳及乳制品每个稀释度接种2片测试片，每片1mL样液，放入自封口袋中封好口。

　　测试片适用于检测或者计数食品及环境样品中的李斯特菌菌数。李斯特菌测试片检测的李斯特菌包括单核细胞增生李斯特菌(Listeria.monocytogenes)，英诺克李斯特菌(Listeria.innocua)，威氏李斯特菌(Listeria.welshi)，但不能区分各种菌。

　　2 操作方法

　　2.1 样品处理:取样品 25 mL（g）放入含有225 mL灭菌磷酸缓冲液稀释液（或生理盐水）的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液。

　　2.2 接种:将测试片置于平坦实验台面，翻开测试片盖膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液均匀地滴加到纸片上，等待纸片完全吸收液体，慢慢放下盖膜，每个稀释度接种两片。同时做一片空白阴性对照。

　　2.3 培养:将测试片叠在一起置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。

　　3 结果判读

　　在测试片上生长的蓝绿色点即为李斯特菌阳性点，若检测板上无菌生长或者长出点为其他颜色点即为李斯特菌阴性。出现阳性菌落的样本，最好用其他更为可靠的方法进行验证。

　　4 报告方式

　　报告每25g（或25ml）样品中检出或未检出李斯特氏菌。

　　5 附加说明

　　注意使用过的测试片上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。

　　6 保存条件

　　本产品需存放在2℃～8℃冰箱中，保质期为一年。