沙门氏菌试纸片说明书

　　一、原理

　　测试片含有沙门氏菌培养基、选择性抑制剂、显色底物和冷

　　GB 5750.12-2006(酶底物法)；NY/T 1665-2008（定性检测）。拧开瓶盖，将100mL水样倒入瓶中摇匀，使培养基溶解，拧紧瓶盖。

　　36℃±1℃培养24h。

　　培养结束后取出培养瓶，水样变黄为大肠菌群阳性；水样变黄同时在紫外灯下显蓝白荧光为大肠杆菌阳性。培养瓶应拧紧瓶盖，倒放在紫外灯上观察荧光。因为紫外光穿透力弱，仅能使液体表面显荧光。如果结果为可疑阳性，可延长培养时间到28h。单位为检出或未检出/100mL。废弃物需经121℃高压灭菌20分钟后处理。

　　水可溶性凝胶。培养基提供沙门氏菌生长所需营养；选择性抑制剂可有效抑制其它细菌生长；当有沙门氏菌生长繁殖，显色底物被分解，游离出显色基团，可疑沙门氏菌菌落呈黑色或红色并伴有紫色晕圈。可疑沙门氏菌需经反应确认片确认后才可判定是否为沙门氏菌。

　　二、包装规格

　　25片/包。

　　三、检验方法

　　1.增菌

　　按GB 4789.4方法增菌，最好能完成2步增菌，如果条件不允许，至少要保证1步增菌。

　　2水化测试片

　　将测试片置于水平台面，揭开上层薄膜，吸1mL样品稀释液滴加于培养层（最好于两条斜对角线滴加，扩散更快，并可避免气泡产生），盖上上层薄膜，不可叠放（否则易漏液），于水平台面静置1h，也可提前一天水化，并冷藏，第二天使用。

　　3.划线接种

　　揭开上层薄膜，挑1接种环增菌后的样液之字形划线，从头划到尾，中间不必灼烧杀菌。

　　4.培养

　　接种后的测试片叠放（不多于10片），36℃±1℃培养16h-18h。培养时注意保湿（于培养箱下层放置一湿盒或者其它容器，倒入2L-3L水即可）。

　　5.判读

　　培养结束后取出测试片，黑色或红色伴有紫色晕圈的菌落为可疑沙门氏菌，需进一步验证；若无黑色或红色伴有紫色晕圈的菌落，直接报阴性结果。

　　6.反应确认实验

　　将测试片上黑色有紫色晕圈的菌落用黑色笔在上层膜进行标记；红色有紫色晕圈的菌落用红色笔进行标记，并在背面相应的位置也进行标记。

　　反应确认片分为2种:黑色有紫色晕圈的菌落用反应确认片1进行验证；红色有紫色晕圈的菌落用反应确认片2进行验证。

　　水化反应确认片:方法同测试片

　　接种:揭开上层膜。用接种针挑取黑色有紫色晕圈的菌落点种在反应确认片1上；挑取红色有紫色晕圈的菌落点种在反应确认片2上。

　　培养:接种后的测试片叠放（不多于10片），36℃±1℃培养24h±2h，并注意保湿。

　　判读:反应确认片1出现红色菌落，背景为紫色判为沙门氏菌阳性；红色菌落伴有黄色晕圈为阴性。反应确认片2出现红色无蓝环菌落为沙门氏菌阳性；红色有蓝环菌落为阴性。

　　四、储存

　　阴凉避光处保存，保质期1年；开封后放于自封口袋中于室温保存，并于1个月内用完。