孟加拉红凝胶琼脂平板说明书

　　一、原理

　　孟加拉红凝胶琼脂平板以孟加拉红琼脂培养基为基础，添加冷水可溶性凝胶，使平板可吸收1mL样液，因此可用于样品检测；孟加拉红可有效抑制杂菌生长及霉菌的蔓延，并使酵母菌菌落显红色。

　　二、包装规格

　　10皿/包。

　　三、检验方法

　　参考NY/T 1331标准，制备样液。取10g或者25g固体/半固体样品，加90mL或者225mL预热至45℃的稀释液（磷酸盐缓冲液或者蛋白胨-盐溶液），制成10-1样液。如果有必要可以继续稀释，选择合适的稀释度备用。将测试片置于水平台面，揭开上层薄膜，吸1mL样液滴加于培养层，缓慢盖上上层薄膜，将匀液板有凹槽部分对准样液区域轻放于上层薄膜上，手指按住压环，同时在压环内轻轻按压，使样液在压环内扩散开，充满整个压环。粮食制品每个样品接种5片，接种好的测试片放于PET自封口袋中（5片/袋），封好口。乳及乳制品每个稀释度接种2片测试片，每片1mL样液，放入自封口袋中封好口。

　　1.样品制备

　　按常规方法制备样液，根据样品中霉菌和酵母菌数量推测选择2-3个连续稀释度备用。

　　2.接种

　　将凝胶琼脂平板取出，吸1mL样液分散滴加于凝胶琼脂表面，晃动平板，使样液均匀分散在凝胶琼脂表面，静置30min使样液完全被吸收。每个稀释度2个重复。对于粘稠样液，应用涂布器涂布，使样液分散均匀；或者加大稀释度降低样液粘度再接种。避免粘稠样液集中在某一处凝胶表面，因分散不均造成局部积液，吸收不完全，导致凝胶硬度低，霉菌易蔓延生长。

　　3.培养

　　接种后的凝胶琼脂平板正放（不可倒置，防止因台面不平，造成部分样液吸收不完全流至皿盖），于霉菌培养箱中28℃±1℃培养48h±2h（需放置湿盒保湿）。

　　4.计数

　　培养结束后取出凝胶琼脂平板，计数霉菌酵母菌数量。表面光滑湿润圆形凸起的菌落为酵母菌；绒毛状、絮状扩散生长的菌落为霉菌。废弃物需经121℃高压灭菌20分钟后处理。

　　四、储存

　　常温避光保存，当温度高于35℃时应注意适当降温，保质期6个月；已开封凝胶琼脂平板用橡皮筋扎好袋口，并于1个月内用完。